دانشمندان دانشگاه دولتی مسکو و همکارانشان مزایای روش پراکندگی ذرات با زاویه کوچک را برای ارزیابی عملکرد پلاکت ها مورد مطالعه قرار دادند. نتایج به دست آمده می تواند مبنایی برای معرفی این روش در عمل بالینی باشد. نتایج این مطالعه که توسط بنیاد علوم روسیه و همچنین بنیاد علوم برای کودکان پشتیبانی می شود، در مجله بین المللی هماتولوژی و وستنیک دانشگاه مسکو منتشر شد.
پلاکت ها عناصر خونی تشکیل شده اند که مسئول توقف خونریزی هستند. وظیفه این سلول ها تشکیل یک پلاگین سنگدانه و چسبندگی به محل آسیب به رگ است. اگر پلاکت ها بیش فعال باشند یا با غلظت افزایش یافته در خون وجود داشته باشند ، خطر تشکیل ترومبوز افزایش می یابد. برعکس ، کاهش تعداد یا فعالیت عملکردی پلاکت ها می تواند تمایل به خونریزی را تحریک کند. مطالعات بالینی به روشی نیاز دارند که امکان ارزیابی کامل عملکرد پلاکت را هم در داوطلبان سالم و هم در بیماران در هر سنی فراهم کند. روش های تجزیه و تحلیل وضعیت پلاکت ها به طور گسترده ای ارائه شده است (آگریومتری بورن، فلوسایتومتری و غیره)، اما هیچ یک از آنها عاری از کاستی نیستند، بنابراین اکنون توسعه فعال روش های جدید و پیشرفته تر وجود دارد.
یکی از این روش ها به طور بالقوه می تواند روش پراکندگی با زاویه کوچک باشد. روش به شرح زیر است: سوسپانسیون ذرات در یک کووت قرار می گیرد که به طور مداوم مخلوط می شود و شرایط برش در جریان خون را شبیه سازی می کند. یک پرتو نور ساطع شده توسط لیزر به سمت سلول هدایت می شود و تابش پراکنده به آرایه آشکارسازهای نوری در پشت سلول برخورد می کند - بنابراین مجموعه ای از مقادیر سیگنال شدت نور را برای زوایای مختلف پراکندگی به دست می آورد. سیگنال توسط یک مبدل آنالوگ به دیجیتال تبدیل می شود و به رایانه منتقل می شود. در صفحه مانیتور، منحنی های شدت پراکندگی نور به عنوان تابعی از زمان برای زوایای 0 تا 12 درجه با افزایش 0.25 درجه مشاهده می شوند.
نرم افزار ویژه این داده ها را پردازش می کند و توزیع اندازه ذرات در دوغاب را محاسبه می کند. پراکندگی با زاویه کوچک را می توان در کاربردهای پتروشیمی، شیمیایی، مواد غذایی و سایر کاربردها اعمال کرد. این روش که برای مشکلات بیوفیزیکی، به ویژه برای تجزیه و تحلیل پلاکت ها اعمال می شود، برای اولین بار در سال 2012 توسط یک گروه علمی از موسسه فیزیولوژی تکاملی و بیوشیمی I.M. Sechenov آکادمی علوم روسیه به کار گرفته شد. گروهی از محققان به سرپرستی ایگور میندوکشف نشان دادند که وابستگی سیگنال شدت پراکندگی نور به زمان می تواند برای قضاوت در مورد تجمع پلاکت ها در دینامیک استفاده شود.
هدف اصلی ما مقایسه روش پراکندگی با زاویه کوچک با سایر روش ها برای ارزیابی عملکرد پلاکت و همچنین تعیین پارامترهای بهینه برای استفاده از آن بود. پارامترهای زیادی وجود دارد که حساسیت روش به آنها بستگی دارد و تعیین محدوده عملیاتی گام بزرگی در جهت استانداردسازی روش است.» گالینا سویدلسکایا، فارغ التحصیل برنامه تحصیلات تکمیلی گروه فیزیک پزشکی دانشکده فیزیک دانشگاه دولتی مسکو، محقق جوان در مرکز مسائل نظری فارماکولوژی فیزیک-شیمیایی آکادمی علوم روسیه.
برای اولین بار وابستگی پارامترهای آزمایش به زمان سپری شده از لحظه به دست آوردن نمونه (پلاسمای غنی از پلاکت) تا اندازه گیری بررسی شد. معلوم شد که حتی در عرض دو ساعت پس از نمونه گیری خون ، پلاکت ها عملکرد خود را حفظ می کنند ، یعنی با القای این فرآیند به تجمع خود ادامه می دهند.
سوال بعدی دانشمندان این بود که چه مقدار پلاسمای انسانی باید به سلول اندازه گیری اضافه شود تا پارامترهای تجمع قابل اعتماد و از نظر بالینی قابل توجه باشند. مشخص شد که وابستگی در غلظت های بالای پلاسما به اشباع می رسد. بنابراین، تعیین محدوده بهینه غلظت پلاکت برای انجام کارهای بیشتر امکان پذیر بود.
علاوه بر این، پلاکت های بزرگسالان سالم، کودکان سالم و کودکان (کودکان غیرطبیعی) مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. معلوم شد که این روش به شما امکان می دهد انحرافات جدی از هنجار را تشخیص دهید (به عنوان مثال ، تجمع ضعیف پلاکت در ترومباستنی گلانزمن). اگر بیماران بیماری هایی داشته باشند که ارتباط مستقیمی با تجمع ندارند ، تشخیص آنها از بیماران سالم با استفاده از این روش دشوار است.
در نهایت روش پراکندگی با زاویه کوچک با روش آگرگاتومتری انتقال نور مورد استفاده در کلینیک مقایسه شد. مشخص شد که ضرایب همبستگی در کوهورت داوطلبان سالم در محدوده 5/0 تا 6/0 قرار دارد، به این معنی که توافق متوسطی در قرائت روش های مختلف وجود دارد. در عین حال، در بیماران مبتلا به ناهنجاری ها، نشانه های این روش ها دیگر به خوبی همگرا نمی شوند.
روش تجمیع سنجی انتقال نور برای ارزیابی عملکرد پلاکت در کارآزمایی های بالینی، "استاندارد طلایی" است. با شاخص های برابر برای تعیین وجود یا عدم وجود بیماری، روش پراکندگی با زاویه کوچک دو مزیت نسبت به تجمع دارد. اولین مورد امکان استفاده برای افرادی است که غلظت کم پلاکت دارند. دوم این که روش پراکندگی با زاویه کوچک به مقدار کمی نمونه نیاز دارد. این می تواند در اطفال راحت باشد، زمانی که گرفتن حجم زیادی از خون از کودکان برای تجزیه و تحلیل دشوار است.
ما قصد داریم به توسعه و آزمایش این روش ادامه دهیم. اکنون ما در حال انجام پروژه ای برای تجزیه و تحلیل عملکرد پلاکت ها در کنسانتره های پلاکتی هستیم. به عنوان مثال ، در صورت خونریزی شدید (آسیب ها ، عوارض جراحی ، زایمان و غیره) ، انتقال اجزای خون می تواند بخشی از یک درمان پیچیده برای حفظ هموستاز باشد. بحث در مورد اینکه چه شرایط نگهداری برای نمونه های کنسانتره پلاکت بهینه است، فروکش نمی کند. روش پراکندگی با زاویه کوچک چشم اندازهای جدیدی را در ارزیابی و انتخاب شرایط ذخیره سازی ترومبو کنسانتره باز می کند.
